产品货号:
BTN3674
中文名称:
病毒DNA提取试剂盒(沉淀法)
英文名称:
Viral DNA Purification Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是专门用于从血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪、培养基、拭子、粪便、组织等样品中提取病毒DNA的试剂盒。提取得到的DNA与PCR、荧光PCR、LAMP等后续扩增技术兼容。
- 回收率高,可以达到90%以上,高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
- 灵敏度高,通过PCR检测到的最终灵敏度可以达到30~50拷贝/mL。
- 一管式操作,不使用离心柱,整个操作过程均在室温下完成。
- 安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
- 可以处理各种液体样品,包括血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪、培养基等,还可以处理拭子,粪便,实体组织等(但需要前处理)。
- 处理量大,如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
组分 | 规格 |
DNA病毒裂解液 | 30mL |
说明书 | 1份 |
保存:室温,有效期1年。
本制品足够50次微量提取,每次微量提取可以处理0.2mL(不需要离心浓缩)或1.5mL的样品(需要离心浓缩)。
异丙醇,75%乙醇。
- 在1.5mL螺旋盖塑料离心管(不要使用压盖式塑料离心管)中加入0.2mL液体样品(血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等)。
- 口腔拭子、咽喉拭子等拭子样品:将拭子放入0.2mL生理盐水中挤压出液体,然后取0.2mL进行DNA提取。
- 粪便等半固定样品:取约0.3mL的样品,加入0.3mL生理盐水,震荡重悬,离心取0.2mL上清进行DNA提取。
- 血液、培养液等含细胞的样品:离心用上清或直接取用,但后者提取的DNA中有细胞的基因组DNA。
- 实体组织或培养细胞样品:需要在自备生理盐水中匀浆后离心,用0.2mL上清液(含病毒)进行DNA提取,但此种情况下最后得到的DNA不可避免的会含有基因组DNA。
- 如果液体样品中的病毒需要富集,可以使用1.5mL上述方法得到的液体在4℃ 24000×g冷冻离心60分钟,移弃1.3mL、用剩下的0.2mL继续操作。
- 口腔拭子、咽喉拭子等拭子样品:将拭子放入0.2mL生理盐水中挤压出液体,然后取0.2mL进行DNA提取。
- 在0.2mL样品中加入0.6mL DNA病毒裂解液,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。
- 振荡30秒混匀后加入0.7mL自备的异丙醇,振荡30秒混匀后,15000×g室温离心15分钟。
- 移弃上清,注意不要触及管底的DNA沉淀,加入1.0mL 75%乙醇,振荡数秒后15000×g室温离心5分钟。
- 移弃上清,注意不要触及管底的DNA沉淀。再短暂离心数秒,移弃残留液体(残留的乙醇会影响后续反应)。
- 如果此时离心面的管壁上有可见的膜状沉淀,属于正常现象(常见于血清血浆样品)。加入20μL自备的TE缓冲液,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀,使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象。不要离心只取上清使用,因为不溶沉淀物中含有DNA,必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
- 样品可以直接取适量用于PCR,也可保存于-20℃长期保存。
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